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免疫共沉淀(Co-IP)优缺点小结2023/11/28
以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法，是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。其原理是：当细胞在非变性条件下被裂解时，完整细胞内存在的许多蛋白质－蛋白质间...
颗粒培养基使用方法与注意事项2023/11/20
使用方法：1、取瓶内弧菌显色培养基干粉71.3克，用1000ml蒸馏水或纯水溶解，可按比例扩增或缩小。搅拌加热煮沸至*溶解，不需高压灭菌，冷至约50℃，倾注灭菌平皿。2、以无菌操作取检样25g(mL)...
培养微生物6大营养来源解读2023/11/13
微生物不是专用于生物分类学的名词，而是指一般需借助显微镜才能看清的所有微小生物的统称，数量庞大且多样。微生物中的“微”便是它的特点之一，是人眼不能直接看到的，有些微生物只有粉尘那么大，而有些微生物更小...
人弹性蛋白（ELN）检测试剂盒应用注意事项2023/11/6
人弹性蛋白（ELN）检测试剂盒应用注意事项：1．ELISA试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀...
科研抗体的制备过程2023/10/30
抗体的制备过程：1.免疫原：普通的大分子蛋白，通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白，纯化鉴定后可直接作为免疫原；小分子蛋白或化合物等分子量小，需要偶联载体对该分子进行改造才能使其...
小鼠骨髓多能干细胞培养操作2023/10/23
小鼠骨髓多能干细胞培养操作：培养操作：一、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基...
多胺氧化酶(PAO)测试盒比色法活性计算2023/10/17
测定原理：PAO催化多胺氧化产生过氧化氢，在过氧化物酶存在的条件下与底物显色，在550nm下有特征吸收峰，通过测定吸光值增加速率来反映PAO活性。PAO活性计算：1、按样本蛋白浓度计算：单位定义：每m...
培养基​间歇灭菌与连续灭菌比较2023/10/8
培养基间歇灭菌与连续灭菌比较:1、歇灭菌的优点和缺点优点是设备要求低，不需另外设置加热、冷却装置；操作要求低，适于手动操作，适合于小批量生产规模；适合于含有大量固体物质的培养基的灭菌。缺点是培养基的营...
原代细胞与传代细胞培养不同点分析2023/10/5
区别一：定义不同原代细胞培养：原代培养是指由体内取出组织或细胞进行的首培养，也叫初代培养。传代细胞培养：传代培养是指需要将培养物分割成小的部分，重新接种到另外的培养器皿（瓶）内，再进行培养的过程。对单...
扩增曲线的四个时期解释2023/9/25
扩增曲线是描述PCR动态进程的曲线，以循环数为横坐标，以反应过程中实时荧光信号强度为纵坐标。理论上PCR过程中反应产物是以指数增长的，但随着PCR循环数的增加，DNA聚合酶失活、dNTP和引物枯竭、反...
PCR反应结果无扩增条带分析2023/9/18
PCR反应结果无扩增条带分析:1、酶失活或在反应体系中未加入酶。TaqDNA聚合酶因保存或运输不当而失活，往往通过更换新酶或用另一来源的酶以获得满意的结果。2、模板含有杂质。特别是对甲醛固定及石蜡包埋...
细胞冻存及复苏操作步骤2023/9/11
细胞冻存及复苏操作步骤：一、冻存1、消化细胞，将细胞悬液收集至离心管中。2、1000rpm离心10分钟，弃上清液。3、沉淀加含保护液的培养，计数，调整至5×106/ml左右。4、将悬液分至冻存管中，每...
PCR反应循环参数注释2023/9/8
循环参数:1.预变性模板DNAwan全变性与PCR酶的wan全激活对PCR能否成功至关重要，建议加热时间参考试剂说明书，一般未修饰的Taq酶激活时间为两分钟。2.变性步骤循环中一般95℃，30秒足以使...
单克隆抗体的性质鉴定方法2023/8/28
当获得多个杂交瘤细胞株时，要了解哪一株是zui适用的，则一定要通过各种鉴定。分析常见的方法有：（一）Ig类型测定通常以免抗小鼠Ig类及亚类抗体与培养液中单克隆抗体按双向琼脂扩散法进行测定，确定其Ig类...
胎牛血清质控外观判定要素2023/8/21
拿到血清，zui先接触的是血清外观，对于缺少细胞培养经验的人来说，外观的判断尤为重要。1、颜色根据血红蛋白含量的不同，胎牛血清可表现出黄色或红色，我国的细胞培养用血清标准是不高于20mg/dl，实际上...
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