极品白丝嫩模被大哥操 PCR反应结果无扩增条带分析:
1、酶失活或在反应体系中未加入酶。Taq DNA聚合酶因保存或运输不当而失活,往往通过更换新酶或用另一来源的酶以获得满意的结果。
2、模板含有杂质。特别是对甲醛固定及石蜡包埋的组织常含甲酸,造成DNA脱嘌呤而影响PCR的结果。
3、变性温度是否准确:PCR仪指示温度与实际温度是否相符,过高酶在前几个循环就迅速失活;过低则模板变性不彻di。
4、反应系统中污染了蛋白酶及核酸酶,应在未加Taq酶以前,将反应体系95℃加热5-10分钟。
5、引物变质失效。人工合成的引物是否正确。是否纯化,或因储存条件不当而失活。
6、引物错误。利用BLAST检查引物特异性或重新设计引物。
7、DNA凝胶电泳时加入阳性对照,确保不是DNA凝胶和PCR程序的问题。
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