高精度制备型液相色谱仪是一种用于将混合物中的目标化合物分离、纯化并制备出一定量高纯度样品的仪器,在化学、生物学、制药等多个领域有着广泛应用。以下是其相关介绍:
一、工作原理
利用不同化合物在固定相和流动相之间的分配系数差异,当样品随着流动相通过装有固定相的色谱柱时,各化合物在两相之间进行反复多次分配,从而使不同化合物得到分离,再通过检测器对分离后的化合物进行检测,根据检测信号收集目标化合物的馏分。
二、系统组成
1.溶剂系统:包括多个溶剂储罐,用于存放不同的流动相溶剂,如甲醇、乙腈、水以及各种缓冲溶液等。
2.输液泵:为流动相提供稳定的驱动力,使流动相能够以设定的流速通过色谱柱。一般采用双柱塞往复泵,具有流量准确、脉动小等特点。
3.进样器:分析型液相和小规模的制备型液相通常使用六通阀进样,更大规模的制备液相为了消除峰的拖尾现象会使用泵进样。
4.色谱柱:是实现样品分离的核心部件,由柱管和固定相组成。制备型液相色谱仪的色谱柱内径通常比分析型色谱柱大,以满足大样品量的分离需求。
5.检测器:常用的是紫外可见光检测器,样品需在可见或紫外光区有吸收。示差折光检测器也较为常用,是连续检测样品流路与参比流路间液体折光指数差值的检测器。
6.馏分收集器:可按多种收集模式自动收集所需馏分,代替手工操作,提高工作效率。
三、主要特点
1.大体积进样:能够处理较大体积的样品,进样量通常比分析型液相色谱仪大得多,可从几十微升到数毫升甚至更大。
2.高流速:配备的输液泵可提供较高的流速,一般在 100 - 3200ml/min,以满足制备规模对分离速度的要求。
3.可获得大量高纯样品:通过优化分离条件和使用合适的色谱柱,能够从复杂的混合物中分离出高纯度的目标化合物,满足后续实验或生产对样品纯度的要求。
四、应用领域
1.天然药物化学和中药化学:用于分离和纯化植物中的有效成分,如生物碱、黄酮类、萜类等化合物,有助于研究天然药物的药效物质基础和开发新药。
2.蛋白纯化:在生物制药和蛋白质研究中,用于分离和纯化各种蛋白质、多肽等生物大分子,为蛋白质结构与功能研究、药物研发等提供高质量的样品。
3.药物杂质纯化:在药物研发和生产过程中,可用于分离和制备药物中的微量杂质,以便对杂质进行结构鉴定和含量测定,从而控制药物质量。
4.手性化合物的制备:在有机合成和药物研发中,对于手性化合物的分离和制备具有重要作用,可获得单一手性构型的化合物,用于研究其生物活性和药理作用。