当前位置:上海研生实业有限公司>>质粒>> pHyVec4
质粒名称:pHyVec4
质粒规格:2ug
实验步骤:
1)质粒提取
1.10,0001min离心收集1.5-5ml菌液沉淀于1.5ml离心管中
2.加入100溶液1,振荡至*悬浮
3.加入200溶液2,立即轻柔颠側离心管6次,使菌体充分裂解,随后将离心管冰上放置
3分钟
4.加入150山溶液3,立即温和颠倒离心管数次,冰上放置3分钟,10,00g离心10mins
5.将步骤4的上清转移至新的离心管(尽量去除杂质),加入等体积的
合均匀10,000离心5min
将步骤5的上清转移至新的离心管,加入2倍体积的无水乙醇,室温放置5-1omin,沉
降DNA
7.10000g离心10分钟,弃乙醇,保留沉淀,加入1ml706的乙醇洗涤沉淀,10,000离
心5分钟
8.倒掉乙醇溶液,用吸水纸吸净管壁上的水珠,室温蒸发痕量乙醇
9.加入适量含 Rnase的TE或灭菌双蒸水溶解质粒DNA
2)质粒鉴定琼脂糖礙胶电泳
灌胶:胶中加入芡光染料< SYBR Green)
加样:质粒+上样緩冲液→混匀
电泳
结果观察:UV灯下
pHyVec4实验分析:
裂解细胞中除含有质粒DNA外,还含有基因组DNA、各种RNA、蛋白质和脂类等物质,因
用碱裂解法除去杂质
1、防止DNA裂解: Solution1
1)、所含糖增加溶洨黏度,維持渗透压,防止DNA受机械剪切作用降解
2)、所含EDTA抑制酶活性
2、溶解与变性: Solution2
1)强碱使质粒DNA和染色体DNA变性
猪胰岛素样生长因子结合蛋白1(IGFBP-1)免疫试剂盒phospho-APG4B(Ser309)
猪胰岛素样生长因子2(IGF-2)免疫试剂盒AFAP
猪胰岛素样生长因子1(IGF-1)免疫试剂盒ADORA1
猪胰岛素(INS)免疫试剂盒ARSB
猪一氧化氮(NO)免疫试剂盒A2BP1
猪氧还原蛋白过氧化物酶2(PRDX2)免疫试剂盒ADAM17
猪氧化低密度脂蛋白(OxLDL)免疫试剂盒ARNT2
猪血小板衍生生长因子(PDGF)免疫试剂盒ABH8
猪血小板活化因子(PAF)免疫试剂盒ABI3BP
猪血纤蛋白原降解产物(FDP)免疫试剂盒ARHGAP20
猪血栓素A2(TXA2)免疫试剂盒ASB10
猪血栓调节蛋白(TM)免疫试剂盒ALDH1L1
猪血清淀粉样蛋白A(SAA)免疫试剂盒Axin 2
猪血红蛋白(Hb)免疫试剂盒AMH
猪血管性血友病因子/瑞斯托霉素辅因子(VWF)免疫试剂盒EphA8
猪血管舒缓激肽(BK)免疫试剂盒Acetoacetyl-CoA synthetase
猪血管生成素2(ANG-2)免疫试剂盒ARNTL2
猪血管生成素1(ANG-1)免疫试剂盒phospho-AANAT (Thr29)
请输入账号
请输入密码
请输验证码
以上信息由企业自行提供,信息内容的真实性、准确性和合法性由相关企业负责,仪表网对此不承担任何保证责任。
温馨提示:为规避购买风险,建议您在购买产品前务必确认供应商资质及产品质量。