过渡原囊菌 返回列表页

微生物菌种的培养：

⒈ 孢子制备

⑴ 孢子的制备

一般采用琼脂斜面培养基，培养基中含有一些适合产孢子的营养成分，如麸皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些无机盐等。碳源和氮源不要太丰富(碳源约为1％，氮源不超过0.5％)，碳源丰富容易造成生理酸性的营养环境，不利于形成，氮源丰富则有利于菌丝繁殖而不利于孢子形成。一般情况下，干燥和限制营养可直接或间接诱导孢子形成。面的培养温度大多数为28 ℃，少数为37 ℃，培养时间为5～14天。

⑵ 霉菌孢子的制备　

霉菌的孢子培养，一般以大米、小米、玉米、麸皮、麦粒等天然农产品为培养基。这是由于这些农产品中的营养成分较适合霉菌的孢子繁殖，而且这类培养基的表面积较大，可获得大量的孢子。霉菌的培养一般为25～28 ℃，培养时间为4～14天。

⒉ 种子制备

⑴ 摇瓶种子制备　

摇瓶种子进罐，常采用母瓶、子瓶两级培养，有时母瓶种子也可以直接进罐。种子培养基要求比较丰富和*，并易被菌体分解利用，氮源丰富有利于菌丝生长。原则上各种营养成分不宜过浓，子瓶培养基浓度比母瓶略高，更接近种子罐的培养基配方。

⑵ 种子罐种子制备　

种子罐种子制备的工艺过程，因菌种不同而异，一般可分为一级种子、二级种子和三级种子的制备。孢子(或摇瓶菌丝)被接入到体积较小的种子罐中，经培养后形成大量的菌丝，这样的种子称为一级种子，把一级种子转入发酵罐内发酵，称为二级发酵。如果将一级种子接入体积较大的种子罐内，经过培养形成更多的菌丝，这样制备的种子称为二级种子，将二级种子转入发酵罐内发酵，称为三级发酵。同样道理，使用三级种子的发酵，称为四级发酵。

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菌种的培养：

1、菌种是指食用菌菌丝体及其生长基质组成的繁殖材料。菌种分为母种（一级种）、原种（二级种）和栽培种（三级种）三级。工业发酵的有用菌种，其筛选步骤包括菌种分离、初筛和复筛。

2、挑选具有某种能力的有用菌种，也称种子制备，是指菌种在一定条件下，经过扩大培养成为具有一定数量和质量的纯生产菌种的制备过程。以作接入发酵罐中进一步扩大菌体量及合成产物之用。

3、种子制备包括孢子制备和菌丝体制备 菌种制备。

4、保存在沙土管或冷冻管中的生产菌种，用无菌手续挑取少许，接入琼脂斜面培养基上，在25℃（或较高温度）下培养5～7天（或较长时间。所得孢子还需进一步用较大表面积的固体培养基以获得更多孢子（对于霉菌类孢子制备，多数采用大米、小米之类的天然培养基）。

5、将培养成熟的斜面孢子制成悬浮液，接种到扁瓶固体培养基上，于25～28℃培养14天。将成熟的扁瓶孢子于真空中抽干，使水分降至10%以下，并放入 4℃冰箱中备用。一次制得的孢子瓶可在生产上延续使用半年左右。

6、如果有些生产菌种不产孢子，如赤霉素产生菌或产孢子不多的，则可采用摇瓶液体培养制得菌丝体，作种子罐的种子。种子罐的目的是使接入有限的孢子或菌丝体迅速发芽、生长、繁殖成大量菌体。其中的培养基组分应是易于被菌体利用的碳源（如葡萄糖）和氮源（如玉米浆），及无机盐(如磷酸盐)等。作为发酵罐的种子应生命力旺盛、染色深、菌丝粗壮，无杂菌及异常菌体。接种量一般在10%～20%。

保存方法：

传代保存法：培养基的浓度不宜过高，营养成分不宜过于丰富，尤其是碳水化合物的浓度应在可能的范围内尽量降低。培养温度通常以稍低于最适生长温度为好。若为产酸菌种，则应在培养基中添加少量碳酸钙 [3] 。

液体石蜡覆盖保存法：该法较前一种方法保存菌种的时间更长，适用于霉菌、酵母菌、放线菌及需氧细菌等的保存。

悬液保存法：

① 蒸馏水保存法：适用于霉菌、酵母菌及绝大部分放线菌，将其菌体悬浮于蒸馏水中即可在室温下保存数年。本法应注意避免水分的蒸发。

② 糖液保存法：适用于酵母菌，如将其菌体悬浮于10%的蔗糖溶液中，然后于冷暗处保存，可长达10年。除此之外，也可使用缓冲液或食盐水等进行保存。

载体保存法：①土壤保存法；②砂土保存法；③硅胶保存法；④磁珠保存法；⑤麸皮保存法；⑥纸片(滤纸)保存法。

常用的冷冻保存法：

① 低温冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃)：低温冷冻保存时使用螺旋口试管较为方便，也可在棉塞试管外包裹塑料薄膜。保存时菌液加量不宜过多，有些可添加保护剂。此外，也可用φ5mm的玻璃珠来吸附菌液，然后把玻璃珠置于塑料容器内，再放入低温冰箱内进行保存的。

② 干冰保存法(-70℃左右)：即将菌种管插入干冰内，再置于冰箱内进行冷冻保存。

③ 液氮保存法(-196℃)：是适用范围*的微生物保存法。

3-氯苄溴 97%人参皂苷Rf 分析标准品，≥98%Cygb (cytoglobin)  球蛋白抗原

2-氯噻吩 96%甘草酸铵盐 97%PAR-2 OP(Protease-activated receptors-2 Activating Orange-peptide)  蛋白激活受体-2桔抗肽

5-氯噻吩-2-磺酰 97%甘草次酸(β型） 97%DLX4 (Dsital-less homebox4 isoformAlpha/ Beta)  末梢同源匡基因多肽片段

5-氯噻吩-2-磺酰氯 96%甘草酸  93%ShK(Stichodactyla helianthus Neurotoxin)  海葵神经素（35肽）

2,2'-二硫二吡 98%染料木苷 from Glycine max (soybean), ≥95% (HPLC)ShK(Stichodactyla helianthus Neurotoxin)-(Ala22)  海葵神经素（35肽）

二苄基硫 99%人参皂苷Rb3 分析标准品，≥98%ShK(Stichodactyla helianthus Neurotoxin)-(Arg22)  海葵神经素（35肽）

2,5-二溴 98%葡萄糖 CPShK(Stichodactyla helianthus Neurotoxin)-(Dap22)  海葵神经素（35肽）

2,5-二溴噻吩 96%牡荆素葡萄糖苷  98%ShK(Stichodactyla helianthus Neurotoxin)-(Gln9)  海葵神经素（35肽）

过渡原囊菌L-苹果 98%人(SS)免疫试剂盒1号染色体开放阅读框194抗体PHYH  植烷氧化抗体

L-苹果 CP人生长激素释放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)免疫试剂盒1号染色体开放阅读框198抗体phospho-β catenin(Tyr142)  化β 连环素蛋白抗体

顺二 AR,99.5%人生长激素释放多肽(GHRP)免疫试剂盒1号染色体开放阅读框21抗体Phospho-Zyxin (Ser142/Ser143)  化斑联蛋白抗体

顺二 CP,99%人生长激素结合蛋白(P)免疫试剂盒1号染色体开放阅读框216抗体Phospho-Zap-70(Tyr493)  化zeta相关蛋白70抗体

顺二 药用级，EP,USP人生长激素(GH)免疫试剂盒1号染色体开放阅读框43抗体Phospho-Zap-70 (Tyr315/Tyr319)  化zeta相关蛋白70抗体

D-苹果 99%人生长分化因子-9(GDF-9)免疫试剂盒1号染色体开放阅读框50抗体phospho-YWHAE(Thr232)  化14-3-3E蛋白抗体

单硬脂甘油酯 >60.0%(GC)人生长分化因子3(GDF3/UNQ222/PRO248)免疫试剂盒1号染色体开放阅读框49抗体phospho-YES1(Tyr537)  化原癌因酪氨蛋白激Yes1抗体

单硬脂甘油酯 99%(GC)人生长分化因子2(GDF2)免疫试剂盒1号染色体开放阅读框53抗体phospho-YES1(Tyr426)  化原癌因酪氨蛋白激Yes1抗体

L-半胱氨 ≥98%,非动物源，用于培养人生长分化因子15(GDF15)免疫试剂盒1号染色体开放阅读框54抗体Phospho-YB1(Ser102)  化DNA结合蛋白B抗体

安息香 99.5%人生长调节致癌因α/黑素瘤生激因子(GROα/CXCL1/MGSA)免疫试剂盒1号染色体开放阅读框55抗体Phospho-YAP1(Tyr407)  化原癌因Yes相关蛋白1抗体

联酰 99.0%人肾小球组织糖化终末产物(GTE-AGE)免疫试剂盒1号染色体开放阅读框56抗体Phospho-YAP1(Ser127)  化原癌因Yes相关蛋白1抗体

安息香二 99%人肾损伤分子1(Kim-1)免疫试剂盒1号染色体开放阅读框65抗体Phospho-WNK1(Thr60)  化赖氨缺陷型蛋白激1抗体

1-羟环己酮 98%人肾素前体免疫试剂盒1号染色体开放阅读框64抗体Phospho-Wee1(Ser642)  化WEE1蛋白抗体

2-羟-2-酮 97%人肾素(Renin)免疫试剂盒1号染色体开放阅读框69抗体Phospho-Wee1(Ser53)  化WEE1蛋白抗体

乙(95%) AR,95.0%人髓质素前体(Pro-ADM)免疫试剂盒1号染色体开放阅读框77抗体Phospho-Wee1(Ser123)  化WEE1蛋白抗体