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菌种的培养：

1、菌种是指食用菌菌丝体及其生长基质组成的繁殖材料。菌种分为母种（一级种）、原种（二级种）和栽培种（三级种）三级。工业发酵的有用菌种，其筛选步骤包括菌种分离、初筛和复筛。

2、挑选具有某种能力的有用菌种，也称种子制备，是指菌种在一定条件下，经过扩大培养成为具有一定数量和质量的纯生产菌种的制备过程。以作接入发酵罐中进一步扩大菌体量及合成产物之用。

3、种子制备包括孢子制备和菌丝体制备 菌种制备。

4、保存在沙土管或冷冻管中的生产菌种，用无菌手续挑取少许，接入琼脂斜面培养基上，在25℃（或较高温度）下培养5～7天（或较长时间。所得孢子还需进一步用较大表面积的固体培养基以获得更多孢子（对于霉菌类孢子制备，多数采用大米、小米之类的天然培养基）。

5、将培养成熟的斜面孢子制成悬浮液，接种到扁瓶固体培养基上，于25～28℃培养14天。将成熟的扁瓶孢子于真空中抽干，使水分降至10%以下，并放入 4℃冰箱中备用。一次制得的孢子瓶可在生产上延续使用半年左右。

6、如果有些生产菌种不产孢子，如赤霉素产生菌或产孢子不多的，则可采用摇瓶液体培养制得菌丝体，作种子罐的种子。种子罐的目的是使接入有限的孢子或菌丝体迅速发芽、生长、繁殖成大量菌体。其中的培养基组分应是易于被菌体利用的碳源（如葡萄糖）和氮源（如玉米浆），及无机盐(如磷酸盐)等。作为发酵罐的种子应生命力旺盛、染色深、菌丝粗壮，无杂菌及异常菌体。接种量一般在10%～20%。

保存方法：

传代保存法：培养基的浓度不宜过高，营养成分不宜过于丰富，尤其是碳水化合物的浓度应在可能的范围内尽量降低。培养温度通常以稍低于最适生长温度为好。若为产酸菌种，则应在培养基中添加少量碳酸钙 [3] 。

液体石蜡覆盖保存法：该法较前一种方法保存菌种的时间更长，适用于霉菌、酵母菌、放线菌及需氧细菌等的保存。

悬液保存法：

① 蒸馏水保存法：适用于霉菌、酵母菌及绝大部分放线菌，将其菌体悬浮于蒸馏水中即可在室温下保存数年。本法应注意避免水分的蒸发。

② 糖液保存法：适用于酵母菌，如将其菌体悬浮于10%的蔗糖溶液中，然后于冷暗处保存，可长达10年。除此之外，也可使用缓冲液或食盐水等进行保存。

载体保存法：①土壤保存法；②砂土保存法；③硅胶保存法；④磁珠保存法；⑤麸皮保存法；⑥纸片(滤纸)保存法。

常用的冷冻保存法：

① 低温冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃)：低温冷冻保存时使用螺旋口试管较为方便，也可在棉塞试管外包裹塑料薄膜。保存时菌液加量不宜过多，有些可添加保护剂。此外，也可用φ5mm的玻璃珠来吸附菌液，然后把玻璃珠置于塑料容器内，再放入低温冰箱内进行保存的。

② 干冰保存法(-70℃左右)：即将菌种管插入干冰内，再置于冰箱内进行冷冻保存。

③ 液氮保存法(-196℃)：是适用范围*的微生物保存法。

T成熟相关蛋白抗体Human MPP3 ELISA Kit肠侵袭性大肠杆探针法荧光定量PCR试剂盒

甲基二酸尿症cblA抗体Human TLR9(Toll-like receptor 9) ELISA Kit虾肝肠微胞虫探针法荧光定量PCR试剂盒

非平滑肌肌球蛋白2A抗体Human MPPE1 ELISA Kit啮蚀艾肯探针法荧光定量PCR试剂盒

DNA修复甲基磺酸敏感性基因19抗体Human MOGAT2 ELISA Kit肠道腺病41型探针法荧光定量PCR试剂盒

19号染色体开放阅读框28抗体Human MOGAT1 ELISA Kit皮炎外瓶霉探针法荧光定量PCR试剂盒

珠蛋白1抗体Human MOK ELISA Kit鸭乙型肝炎病探针法荧光定量PCR试剂盒

肌红蛋白抗体Human MPPED1 ELISA Kit大片吸虫探针法荧光定量PCR试剂盒

错配修复蛋白6抗体Human MPPED2 ELISA Kit铅黄肠球探针法荧光定量PCR试剂盒

Burkholderiaxenovorans2,4-二 97%大鼠质金属蛋白4(MMP-4)免疫试剂盒脂酰蛋白聚糖1抗体HMGA1/HMG-I/HMG-Y  高迁移率族蛋白A1抗体

D-苹果二酯 98%大鼠质金属蛋白3(MMP-3)免疫试剂盒糖原合激3α抗体HMG14/HMGN1  高迁移率核小体结合蛋白1

4-氟吡盐盐  98%大鼠质金属蛋白2/明胶A(MMP-2/Gelatinase A)免疫试剂盒素单克隆抗体HMBS/PBGD  卟胆原脱氨抗体

5-羟-1-茚酮 98%大鼠质金属蛋白14(MMP-14)免疫试剂盒硫转移ω1抗体HLX1  同源异型盒因HLX1蛋白抗体

4-羟 98%大鼠质金属蛋白13(MMP-13)免疫试剂盒间隙连接蛋白31抗体HLTF  解旋样转录因子抗体

盐98%大鼠质金属蛋白10(MMP-10)免疫试剂盒甘氨-N-转移HLC8/Lung cancer related protein 8  肺癌相关蛋白8抗体

3--4-硝吡-N-氧化物 98%大鼠质金属蛋白1(MMP-1/Collagenase I)免疫试剂盒G蛋白偶联受体75抗体HLC3/Kanadaptin  肺癌癌因蛋白3抗体

2--4-硝氧化吡 98%大鼠肌质网膜钙ATP(SERCA)免疫试剂盒GATA结合蛋白4抗体HLA-DR  HLA-DR抗体

间三氟酯 99%大鼠肌激同工MM(CK-MM)免疫试剂盒兔抗γ1氨丁抗体HLA G(N-Terminus)  人类白抗原G抗体（N端）

4-哌酮盐盐，水合 98%大鼠肌激同工MB(CK-MB)免疫试剂盒G蛋白偶联受体GPR85蛋白抗体HLA G(C-terminal)  人类白抗原G抗体（C端）

4-氨三氟 98%大鼠肌激同工BB(CK-BB)免疫试剂盒素抗体HLA E  人类白抗原E抗体

邻三氟 98%大鼠肌球蛋白(MYS)免疫试剂盒半糖凝集素9抗体HLA DMβ  组织相容性复合体β抗体

3-(三氟)酰 98%大鼠肌红蛋白(MYO/MB)免疫试剂盒促代谢型谷氨受体2+4抗体HLA DM  组织相容性复合体α抗体

4-(三氟) 96%大鼠肌酐(Cr)免疫试剂盒GPNMB抗体HLA Class 1 ABC/HLAabc  人类白抗原A抗体

4-(三氟)酚 97%大鼠饥饿激素(GHRL)免疫试剂盒γ谷氨酰转肽2轻链抗体HLA B/HLA G  人类白抗原G抗体

微生物菌种的培养：

⒈ 孢子制备

⑴ 孢子的制备

一般采用琼脂斜面培养基，培养基中含有一些适合产孢子的营养成分，如麸皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些无机盐等。碳源和氮源不要太丰富(碳源约为1％，氮源不超过0.5％)，碳源丰富容易造成生理酸性的营养环境，不利于形成，氮源丰富则有利于菌丝繁殖而不利于孢子形成。一般情况下，干燥和限制营养可直接或间接诱导孢子形成。面的培养温度大多数为28 ℃，少数为37 ℃，培养时间为5～14天。

⑵ 霉菌孢子的制备　

霉菌的孢子培养，一般以大米、小米、玉米、麸皮、麦粒等天然农产品为培养基。这是由于这些农产品中的营养成分较适合霉菌的孢子繁殖，而且这类培养基的表面积较大，可获得大量的孢子。霉菌的培养一般为25～28 ℃，培养时间为4～14天。

⒉ 种子制备

⑴ 摇瓶种子制备　

摇瓶种子进罐，常采用母瓶、子瓶两级培养，有时母瓶种子也可以直接进罐。种子培养基要求比较丰富和*，并易被菌体分解利用，氮源丰富有利于菌丝生长。原则上各种营养成分不宜过浓，子瓶培养基浓度比母瓶略高，更接近种子罐的培养基配方。

⑵ 种子罐种子制备　

种子罐种子制备的工艺过程，因菌种不同而异，一般可分为一级种子、二级种子和三级种子的制备。孢子(或摇瓶菌丝)被接入到体积较小的种子罐中，经培养后形成大量的菌丝，这样的种子称为一级种子，把一级种子转入发酵罐内发酵，称为二级发酵。如果将一级种子接入体积较大的种子罐内，经过培养形成更多的菌丝，这样制备的种子称为二级种子，将二级种子转入发酵罐内发酵，称为三级发酵。同样道理，使用三级种子的发酵，称为四级发酵。