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经典三级视频在线观看 进口原装elisa试剂盒分析细胞活力鉴定

时间:2017-8-30阅读:157
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进口原装elisa试剂盒原理: 

    细胞损伤或死亡时,台盼蓝可穿透变性的细胞膜,与解体的DNA 结合,使其着色。而活细胞能阻止染料进入细胞内。故可以鉴别死细胞与活细胞。  

    用品: 

    1. 4%台盼蓝母液:称取4g台盼蓝,加少量蒸馏水研磨,加双蒸水至100ml,用滤纸过滤,4度保存。使用时。用PBS稀释至0.4%。 2. 吸管、血细胞计数板、显微镜  

    步骤: 

    1、制备单细胞悬液。并作适当稀释(106 细胞/ml) 2、染色:细胞悬液与0.4%台盼蓝溶液以9:1混合混匀。 3、计数:在三分钟内,用计数板分别计数活细胞和死细胞  

    结果统计: 

    镜下观察,死细胞被染成淡蓝色,而活细胞拒染。 根据下式求细胞活力: 

    活细胞率(%)= 活细胞总数/(活细胞总数+死细胞总数)×100  

    注意事项:台盼蓝染细胞时,时间不宜过长。否则,部分活细胞也会着色,会干扰计数。

    台盼蓝染色原理 

    通常认为细胞膜丧失完整性,细胞即可被认为已经死亡。台盼蓝(Trypan Blue)是检测细胞膜完整性常用的生物染色试剂。健康的正常细胞能够排斥台盼蓝,而死亡的细胞,膜的完整性丧失,通透性增加,细胞可被台盼蓝染成蓝色。依据此原理,细胞经台盼蓝染色后,可通过显微镜,直接镜下计数或拍照后计数,实现对细胞存活率比较的定量分析。 

    进口原装elisa试剂盒试述台盼蓝染发鉴别死活细胞的原理,试分析染色时间过长本来是活细胞也被染色的原因  

    死细胞的细胞膜无屏障作用,台盼蓝马上进入细胞而显蓝色。活细胞细胞膜有选择透性,对台盼蓝的透性小,进入细胞慢。若染色时间过长,台盼蓝可能通过胞吞或胞饮作用进入细胞。 
RIPA组织/细胞快速裂解液    N/A    20ml    0
RIPA组织/细胞裂解液    N/A    100ml    0
Mueller-Hinton Agar mha MBA    N/A    250g    0
Mueller-Hinton Broth 肉汤 MHB    N/A    250g    0
马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)    N/A    500g    0
BSA﹠PBS缓冲液(干粉)    N/A    1L    0
SSC缓冲液(干粉)    N/A    500G    0
进口原装elisa试剂盒

 

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