脆弱拟杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
膜粘连蛋白11抗体
膜粘连蛋白13抗体
磷酸化促肾上腺皮质激素ACTH抗体
磷酸化蛋白激酶AKT1抗体
磷酸化蛋白激酶B抗体
磷酸化钠钾ATP酶蛋白a1抗体
磷酸化内收蛋白a1抗体
磷酸化腺苷单磷酸活化蛋白激酶α1抗体
磷酸化腺苷单磷酸活化蛋白激酶α2抗体
酸性神经酰胺酶1抗体
粘附调节分子1抗体
气味结合蛋白抗体
乙醛脱氢酶2抗体
膜粘连蛋白10抗体
前梯度同源蛋白2抗体
乙醛脱氢酶5抗体
通用转录因子IIA样因子抗体
自噬相关蛋白4D抗体
自噬相关蛋白9A抗体
醛缩酶C抗体
谷草转氨酶抗体
三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员5抗体
三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员8抗体
磷酸化细胞凋亡信号调节激酶1抗体
转化生长因子β诱导蛋白3抗体
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