经典三级视频在线观看 柠檬酸（CA）含量测定​活性计算方法

柠檬酸（CA）含量测定活性计算：

（1） 按样本蛋白浓度计算

单位的定义：每 mg 组织蛋白每分钟生成 1 nmol 的 NADH 定义为一个酶活力单位。

α-KGDH活性（nmol/min /mg prot）＝[ΔA×V反总÷（ε×d）×109

]÷(V样×Cpr) ÷T=1608×ΔA÷Cpr

（2） 按样本鲜重计算：

单位的定义：每 g 组织每分钟生成 1 nmol 的 NADH 定义为一个酶活力单位。

α-KGDH（nmol/min /g 鲜重）＝[ΔA×V 反总÷（ε×d）×109

]÷(W× V 样÷V 样总) ÷T=325×ΔA÷W

（3） 按细菌或细胞密度计算：

单位的定义：每 1 万个细菌或细胞每分钟生成 1 nmol 的 NADH 定义为一个酶活力单位。

α-KGDH 活性（nmol/min/104

 cell）＝[ΔA×V 反总÷（ε×d）×109

]÷(500×V 样÷V 样总)

÷T=0.65×ΔA

V 反总：反应体系总体积，2×10-4

 L；ε：NADH 摩尔消光系数，6.22×103

L / mol /cm；d：

比色皿光径，1cm；V 样：加入样本体积，0.01 mL；V 样总：加入提取液体积，0.202 mL；

T：反应时间，2min；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g；500：细菌或细

胞总数，500 万。

b.用 96 孔板测定的计算公式如下

（1） 按样本蛋白浓度计算：

单位的定义：每 mg 组织蛋白每分钟生成 1 nmol 的 NADH 定义为一个酶活性单位。

α-KGDH 活性（nmol/min /mg prot）＝[ΔA×V 反总÷（ε×d）×109

]÷(V 样×Cpr) ÷T=3216×ΔA÷Cpr

（2） 按样本鲜重计算：

单位的定义：每 g 组织每分钟生成 1 nmol 的 NADH 定义为一个酶活性单位。

α-KGDH 活性（nmol/min/g 鲜重）＝[ΔA×V 反总÷（ε×d）×109

]÷(W× V 样÷V 样总)

÷T=650×ΔA÷W

（3） 按细菌或细胞密度计算：

单位的定义：每 1 万个细菌或细胞每分钟生成 1 nmol 的 NADH 定义为一个酶活性单位。

α-KGDH 活性（nmol/min/104

 cell）＝[ΔA×V 反总÷（ε×d）×109

]÷(500×V 样÷V 样总) ÷T=1.3×ΔA

V 反总：反应体系总体积，2×10-4

 L；ε：NADH 摩尔消光系数，6.22×103

L / mol /cm；d：

96 孔板光径，0.5cm；V 样：加入样本体积，0.01 mL；V 样总：加入提取液体积，0.202 mL；

T：反应时间，2min；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g；500：细菌或细

胞总数，500 万。