TSZelisa试剂盒如何对细胞进行分级分离取决于很多因素,包括哪些仪器、知识可以利用,您想要分离什么,以及这些组分的下游应用是什么。
离心是细胞分级分离中常用的技术之一,它们单独使用,或与其他方法结合。例如,对于高尔基体或过氧化物酶体,大部分操作都要求高速的密度梯度离心。然而,O’Hara Noonan也指出,超速离心也有一些缺点,包括超速离心机是高价的仪器,有些实验室无法接触到。另外,密度梯度难以倾倒是出了名的,其结果是技术依赖的。
当然,其他的许多组分也可以只利用试剂和台式仪器来富集。供应商开发出一些试剂盒,能方便快捷地带来高度富集的细胞组分。赛默飞世尔全新设计的Mem-PER Plus试剂盒,能在一小时之内富集完整的膜相关蛋白。
据sigma-aldrich的产品专家Michael Moehlenbrock介绍,这类试剂盒的原理在很大程度上是类似的。它们往往使用低渗缓冲液给细胞膜带来压力,然后用等渗的提取缓冲液(带或不带还原剂和蛋白酶抑制剂)来维持感兴趣的细胞器。有时也需要机械裂解或去污剂裂解。“各个不同供应商在细胞分级分离试剂盒的设计上都是一致的,而不同细胞组分的差异在于缓冲液组成、裂解试剂和离心速度,”Moehlenbrock说。
此类试剂盒的价值并不在于某些秘密试剂,而在于QC系统的一致性和重复性。“细胞分级分离的方法已经过充分鉴定,其操作步骤适用于大部分应用,”Moehlenbrock说。“商业化试剂盒为终用户带来了简便和效率,同时提供了*的安全性。”
通过改变穿插在离心步骤之间的缓冲液的去污剂组分,研究人员可分离不止一个组分。例如,市场上许多试剂盒可收集细胞核和胞浆蛋白。其他试剂盒也带来了三个或四个不同的组分。Cell Signaling Technology的Cell Fractionation Kit产生了细胞质、细胞膜/细胞器以及细胞核/细胞骨架组分,而QIAGEN的Qproteome Cell Compartment Kit分离出细胞质、细胞膜、细胞核和细胞骨架组分。
美天旎提供一种不含去污剂的试剂盒,TSZelisa试剂盒利用TOM22抗体标记的磁珠来特异分离线粒体。据该公司的介绍,他们不提供其他亚细胞组分的产品,但客户可以利用自己的抗体来间接分离其他组分。
同样地,赛默飞世尔的Cell Surface Protein Isolation Kit标记细胞表面蛋白的外部赖氨酸,它具有一个可切割的生物素衍生物,让此蛋白组分在细胞裂解后可被捕获。
(S)-(+)-3-甲基-1-戊醇(>98.0%(GC)) 英文名称: (S)-(+)-3-Methyl-1-pentanol 质量规格: >98.0%(GC) 号: 42072-39-9
(S)-(+)-3-羟基丁酸甲酯(>98.0%(GC)) 英文名称: Methyl (S)-(+)-3-Hydroxybutyrate 质量规格: >98.0%(GC) 号: 53562-86-0
(S)-(+)-4-甲基-1-己醇(>98.0%(GC)) 英文名称: (S)-(+)-4-Methyl-1-hexanol 质量规格: >98.0%(GC) 号: 1767-46-0
(S)-(+)-5-甲基-1-庚醇(>96.0%(GC)) 英文名称: (S)-(+)-5-Methyl-1-heptanol 质量规格: >96.0%(GC) 号: 57803-73-3
TSZelisa试剂盒
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