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经典AV三级在线观看 elisa定量检测试剂盒实验的操作要点

时间:2017/8/3阅读:387
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的试剂,良好的仪器和正确的操作是保证elisa定量检测试剂盒检测结果准确可靠的必要条件。ELISA的操作因固相载体的形成不同而有所差异。
一、标本的采取和保存
   可用作ELISA测定的标本十分广泛,体液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、粪便)等均可作标本以测定其中某种抗体或抗原成份。有些标本可直接进行测定(如血清、尿液),有些则需经预处理(如粪便和某些分泌物)。在ELISA中血浆和血清可同等应用。血清标本可按常规方法采集,应注意避免溶血,红细胞溶解时会释放出具有过氧化物酶活性的物质,以HRP为标记的ELISA测定中,溶血标本可能会增加非特异性显色。
二、试剂的准备
   按试剂盒说明书的要求准备实验中需用的试剂。ELISA中用的蒸馏水或去离子水,包括用于洗涤的,应为新鲜的和高质量的。自配的缓冲液应用pH计测量较正。从冰箱中取出的试验用试剂应待温度与室温平衡后使用。试剂盒中本次试验不需用的部分应及时放回冰箱保存。
三、加样
   在ELISA中一般有3次加样步聚,即加标本,加酶结合物,加底物。加样时应将所加物加在ELISA板孔的底部,避免加在孔壁上部,并注意不可溅出,不可产生气泡。加标本一般用微量加样器,按规定的量加入板孔中。加酶结合物应用液和底物应用液时可用定量多道加液器,使加液过程迅速完成。
四、保温
   在ELISA中一般有两次抗原抗体反应,即加标本和加酶结合物后。抗原抗体反应的完成需要有一定的温度和时间,这一保温过程称为温育(incubation),有人称之为孵育,在elisa定量检测试剂盒中似不恰当。五、 洗涤
   洗涤在ELISA过程中虽不是一个反应步骤,但却也决定着实验的成败。ELSIA就是靠洗涤来达到分离游离的和结合的酶标记物的目的。通过洗涤以清除残留在板孔中没能与固相抗原或抗体结合的物质,以及在反应过程中非特异性地吸附于固相载体的干扰物质。聚苯乙烯等塑料对蛋白质的吸附是普遍性的,而在洗涤时又应把这种非特异性吸附的干扰物质洗涤下来。
六、显色和比色
(一) 显色
   显色是ELISA中的后一步温育反应,此时酶催化无色的底物生成有色的产物。
(二)比色
   比色前应先用洁净的吸水纸拭干板底附着的液体,然后将板正确放入酶标比色仪的比色架中。以软板为载体的试验,需先将板置于标准96孔的座架中,才可进行比色。
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Anti-IFN-γAnti-Human      规格:    规格:     0.1ml    产品名称:    干扰素-γ抗体
Anti-IFN-γAnti-mouse、rat      规格:    规格:     0.1ml    产品名称:    干扰素-γ抗体 
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Anti-IGC       规格:    规格:     1ml    产品名称:    兔抗非洲爪蟾IGC抗体
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