许多说明书、教科书上都提到,加样时要防止呈现气泡,这到底是什么原因呢?由于在做实验的过程中,有时为了打洁净枪头里面的液体,ELISA试剂盒很简单发生气泡,是不是这样对实验结果会后什么影响?
1.一般气泡都是聚集在酶标板的孔周围,导致孔中液体不能与孔壁有用触摸,使孔内反响不均一。
3.包被时有气泡的话,将导致包被不*实践包被量下降--弱阳性乃至假阴性。
4.关闭时有气泡的话,将导致很多未结合位点的存在,引起非特异性结合--本底增高,假阳性。
5.加样时有气泡的话,抗原抗体不能有用的结合--弱阳性乃至假阴性。
6.加二抗时有气泡的话,抗原抗体不能有用的结合--弱阳性乃至假阴性(竞争法相反----假阳性)。
7.加显色液时有气泡的话---显色不*。
8.加停止液时有气泡的话(1、不能*停止反响 2、影响酶标仪比色,OD值增高)
9.洗刷时有气泡的话,ELISA试剂盒非特异性结合物不能*洗去,做无用功。
防止办法:
1、加样时尽量靠近孔底(不要触摸孔底),用力均匀,不要过快过猛。
2、关闭时一定要加满孔,
3、洗刷时一定要加满孔(重要),气泡会浮上来终究驱除。手艺洗板时一定要吸干水分并用力拍干。
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