影响ELISA中非特异性显色的原因很多，如试剂盒特异性、检验标本中含酶标记物的干扰物，操作过程中的问题。本文就这一原因作一简要分析,以便可以通过以上措施把非特异显色降至zui低限度，从而提高检测的特异性，并得到更准确、可靠的实验结果。
ELISA试剂盒特异性因素
1、1 固相载体的选择。ELISA中常用的固相载体有微量滴定板、小珠和小试管三种，以微量滴定板zui为常见。
1、2包被物的纯度。在酶联免疫测定尤其是间接ELISA中，试剂的特异性取决于使用抗原的纯度。
1、3包被抗体的效价。具有高亲和力和高特异性的包被抗体，是决定试剂特异性的重要方面。
1、4 封闭。是ELISA中重要的一步，目的是封闭固相载体表面尚未被所占据的空隙，减少后续步骤中非特异性蛋白的干扰。
ELISA试剂盒中检验标本中含有酶标记物的干扰物
2、1内源性干扰物：类风湿因子（RF）、黄疸等，类风湿因子是可作用于多种动物以及人IgGFc段的自身抗体，多数为IgM类，能充当抗原成分与固相及酶标抗体反应，从而呈现非特异性显色。
2、2 外源性干扰物，常常因样品采集、贮存、处理不当造成如样品溶血，被细菌污染，标本凝集不全等。溶血标本，红细胞溶解破裂，释放出血红素形成，而血红素中的铁卟啉是过氧化物酶的类似物，以HRP为标记的ELISA测定中，溶血标本可能会增加非特异性显色。
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