经典AV三级在线观看 小鼠ELISA试剂盒技术的发展

   临床测定技术的发展主要在于方法学的发展，而方法学的发展依托于小鼠ELISA试剂盒生产技术不断进步更新和新型标记物的应用。目前，分子生物学正在并zui终肯定会让我们对整个生命科学有一个全面而*的认识，其对免疫测定技术发展的影响也是直接而又有效的，它使我们对以前一些难以检测的生物活性物质的测定变得轻而易举，并且大大提高了检测的灵敏度和特异性。

1、基因工程试剂对免疫测定技术发展的影响

免疫测定技术的基础在于抗原抗体之间的特异结合反应，所以任何的诊断试剂离不开的原料，如抗原抗体，酶等。以前用于免疫测定的抗原通常为各种纯化抗原，而抗体则为纯化抗原免疫动物后获得的多克隆抗体和使用杂交瘤技术得到的单克隆抗体，而抗原或抗体的标记物如酶标结合物则通过各种化学合成方法制备。近年来，随着分子生物学的发展，使用基因工程方法制备各种特殊的抗原或抗体及其酶结合物等免疫测定试剂几成为现实的新一代试剂，各种新型使用的测定方法也不断出现。

HBsAg试剂特点（检测模式：临床抗体夹心法）：

包被抗体为山羊多抗，多抗具有高亲和性和对抗原各种表位的反应性。

酶表抗体为与HBsAg有不同结合位点的鼠复合单位。

可测得HBsAg变异样品。

提高检测的特异性（99。98%）

提高检测的灵敏度，应用Parl  Ehrich 学说（PEI）HBsAg标准品，对ad标准品的灵敏度为0。05nｇ/ml对ay标准品灵敏度为0。025ng/ml

2、基因工程

较早用于免疫测定的基因工程抗原是HBcAg和HBsAg，这两种基因工程抗原的出现，较好地解决了抗HBc和HBe的测定问题。因为要从病毒本身去大量获取这两种纯抗原较为困难，并且这一点对于难培养的病原微生物来说，如HIV、HCV和梅毒螺旋体等都有些共性。

2。1  HCV-Elisa试剂

HCV目前尚不能体外培养，只能用基因工程或化学合成方法获取HCV结构和非结构区的各种抗原片断，已知HCV基因组有7个功能区组成：核心、E1、E2/NS1 NS2 NS3 NS4 NS5（有分为NS和NS5b）区，合成抗原的优点是易于纯化，特异性好，抗原抗体反应强。

2。1。1  *代抗HCV-小鼠ELISA试剂盒：

-由美国ortho公司克隆C1003抗原几个片断与人超氧化物歧化酶（SOD）结合。用酵母从病毒基因组非结合区得到表达，表达为融合蛋白，亦作为包被固相载体。

-抗原组合：NS4 区二个基因片断为NS 5-1-1和C1003

-特性：IgG抗C100在发病后数月后，才检出，故不宜作早期诊断。

-约由20%的病人不出现抗体。IgM抗-C100急性期检出率只有64%。

-C100的抗原性较弱，在HCV复制中，不能充分暴露宿主的免疫系统。

-特异性和灵敏性较差。

2。1。2  第二代HCV-小鼠ELISA试剂盒

-用基因重组的HCV结构蛋白与非结构蛋白抗原包被固相载体。

-抗原组合：核心区（C区）多肽C22  NS区多肽C33  C1003和NS 5-1-1

-增加C22区和C33区后，抗体出现早，有助早期诊断，提高阳性率。有利早期诊断。