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操作步骤：
夹心法，一般的操作步骤为:
将具有专一性的抗体固著于塑胶孔盘上，完成后洗去多余抗体;
加入待测检体，检体中若含有待测的抗原，则其会与塑胶孔盘上的抗体进行专一性键结;
洗去多余待测检体，加入另一种对抗原专一的一次抗体，与待测抗原进行键结;
洗去多余未键结一次抗体，加入带有酶的二次抗体，与一次抗体键结;
洗去多余未键结二次抗体，加入酶底物使酵素呈色，以肉眼或仪器读取呈色结果;
间接法，一般的操作步骤为：
将已知的抗原固著于塑胶孔盘上，完成后洗去多余的抗原。
加入待测检体，检体中若含有待测的一次抗体，则其会与塑胶孔盘上的抗原进行专一性键结。
洗去多余待测检体，加入带有酶的二次抗体，与待测的一次抗体键结。
洗去多余未键结二次抗体，加入酶底物使酶呈色，藉仪器测定塑胶盘中的吸光值，以评估有色终产物的含量即可测量待测抗体的含量。
竞争法，其操作步骤为：
将具有专一性的抗体固著于塑胶孔盘上，完成后洗去多余抗体
加入待测检体，使检体中的待测抗原与塑胶孔盘上的抗体进行专一性键结
加入带有酶的抗原，此抗原也可与塑胶孔盘上的抗体进行专一性键结，由于塑胶孔盘上固著的抗体数量有限，因此当检体中抗原的量越多，则带有酶的抗原可键结的固著抗体就越少，亦即，两种抗原皆竞相与塑胶孔盘上抗体键结，即所谓竞争法之由来。
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