大肠埃希氏菌定义
大肠埃希氏菌是指能产生β
-
半乳糖苷酶(β
-D-galactosidase
)分解
ONPG
(
Ortho-nitrophenyl-
β
-D-galactopyranoside
)使培养液呈黄色,能产生β
-
葡萄糖醛酸酶(β
-glucuronidase
)分解
MUG
(
4-methyl-umbelliferyl-
β
-D-glucuronide
)使培养液在波长
366nm
紫外光下产生荧光的细菌。
检测重要性
《生活饮用水标准检验方法》 GB/T 5750-2006 中将大肠埃希氏菌列入检测项目中。并在解读《生活饮用水卫生标准》 GB5749-2006 中阐述:“只有埃希氏大肠杆菌是粪源特异性的,是准确和专一的粪便污染指示”。
二、用途 :大肠埃希氏菌测定荧光观察使用方法:插上电源,将经过 24 小时培养后的 EC-MUG 管在灯下照射,如有蓝色荧光产生则为大肠埃希氏菌阳性管;
暗箱式: BOT-UVIIIA
一、技术参数:
1 、电压: 220v 50HZ
2 、功率: 8W*2
3 、波长: 366nm
4 、滤光片: 200X50 mm
5 、 辐照: 30CM 内强度约为 1480μW/cm2
6 、防紫外线观察窗 :160*80mm
8 、具有过流 , 过压保护装置
9 、规格尺寸: 385X340X330mm
10 、重量 5Kg
11 、*的内部黑色涂层设计,观察更清晰。
三、注意事项:每次观察时,用一个没开封的 EC-MUG 管和被测的 EC-MUG 管在紫外光灯同时观察,如果被测的 EC-MUG 管产生荧光,在紫外光灯下与没开封的 EC-MUG 管比较,有明显的区别。每次测试完后将电源拔掉。
四、具体方法
:
取供试液
10ml(
相当于供试品
1g
、
1ml
)
,
直接或处理后接种至适量
(
不少于
100ml)
的胆盐乳糖培养基中
,
培养
18--24
小时
,
必要时可延长至
48
小时
.
取上述培养物
0.2ml,
接种至含
5mlMUG
培养基的试管内
,
培养
,
于
5
小时、
24
小时在
366nm
紫外线下观察
,
同时用未接种的
MUG
培养基作本底对照
.
若管内培养物呈现荧光
,
为
MUG
阳性
,
不呈现荧光
,
为
MUG
阴性
.
观察后
,
沿培养管的管壁加入数滴靛基质试液
,
液面呈玫瑰红色
,
为靛基质阳性
,
呈试剂本色
,
为靛基持阴性
.
本底对照应为
MUG
阴性和靛基质阴性
.
如
MUG
阳性
,
靛基质阳性
,
判供试品检出大肠埃希菌
;
如
MUG
阴性
,
靛基质阴性
,
判供试品未检出大肠埃希菌
;
如
MUG
阳性
,
靛基质阴性
,
或
MUG
阴性
,
靛基质阳性
,
则应取胆盐乳糖培养基的培养物划线接种于曙红*琼脂培养基或麦康凯琼脂培养基的平板上
,
培养
18--24
小时
.
若平板上无菌落生长
,
或生长的菌落与表所列的菌落形态特征不符
,
判供试品未检出大肠埃希菌
.
若平板上生长的菌落与表所列的菌落形态特征相符或疑似
,
应进行分离
,
纯化
,
染色镜检和适宜的生化试验
,
确认是否为大肠埃希菌
.
大肠菌形态特征
用曙红*培养基
:
呈紫黑色、浅紫色、蓝紫色或粉红色
,
菌落中心呈深紫色或无明显暗色中心
,
圆形
,
稍凸起,边缘整齐,表面光滑,湿润,常有金属光泽