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产品名称 |
原代小鼠晶状体上皮细胞 |
英文名称 |
Mouse Lens Epithelial Cells |
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规格 |
5×10⁵Cells/T25培养瓶 |
货号 |
GOY-01X1063 |
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组织来源 |
晶状体组织 |
细胞形态 |
上皮细胞样 |
培养信息：
包被条件 鼠尾胶原 Ⅰ（2-5μg/cm2）
培养基 含 FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每 2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 上皮细胞样
传代特性 可传 1-2代
消化液 0.25%yi蛋白酶
培养条件 气相：空气， 95%；CO2，5%
细胞简介：
小鼠晶状体上皮分离自晶状体组织；晶状体源自胚胎发育外胚层，仅含有上皮细胞及其产物，晶状体囊膜作为屏障将晶状体与其它类型细胞
wan全分开；因而，晶状体上皮细胞培养既无神经和血管组织的干扰，又不受其它类型细胞如成纤维细胞的污染，保证了培养中细胞成分的单一性。晶状体上皮细胞主要负责调节晶状体的生理平衡，包括电解质和液体的输送。在正常的发育过程中，晶状体上皮细胞分化和成熟，然后迁移到晶状体内部，产生晶体蛋白，自身也拉长而变成晶状体纤维细胞，并最终失去细胞核和其它的细胞器。研究表明，晶状体上皮细胞的分化和极化受到了眼部液体中的生长因子的调控，包括表皮生长因子和胰岛素等。细胞贴壁后为扁平不规则多角形，呈单层生长、连成膜状。晶状体上皮细胞是紧密贴附于晶状体前囊内表面的单层上皮细胞，其异常增殖和分化与白内障和后囊混浊的发生密切相关，体外培养是研究其生长规律的主要手段。
方法简介：
公司实验室分离的小鼠晶状体上皮采用
yi蛋白酶-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法，并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测：
公司实验室分离的小鼠晶状体上皮经 BFSP2（晶状体蛋白）免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
1) 将5-10d的乳鼠浸泡入75%乙醇中，移入生物安全柜，
2) 从胸部解剖乳鼠，取出双肺置于预冷的PBS中，尽可能的除去结缔组织等，
3) 取肺边缘部分，剪碎，将组织块移入T25培养瓶中，倒置于细胞培养箱中，
4) 2h后，培养瓶中注入2 mL内皮培养基，小心将培养瓶正置于培养箱，确保组织块不会飘起来，
5) 每3d换液2mL，待细胞从组织块中爬出来后，隔2d换液，待细胞融合达到60-70%左右时，去除组织块，将肺微血管内皮细胞重新铺瓶。
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小鼠杂交瘤细胞株； JF-IgD |
小鼠杂交瘤细胞株； Sm-IgM |
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小鼠杂交瘤细胞株； LB_001 |
锦鲤疱疹病毒（ KHV）核酸检测试剂盒（恒温荧光法） |
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小鼠杂交瘤细胞株； 3D5 |
鲤春病毒血症病毒（ SVCV）RNA核酸检测试剂盒（恒温荧光法） |
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小鼠杂交瘤细胞株； VP13-6G10 |
草鱼出血病 III型病毒（GCRV III）RNA核酸检测试剂盒（恒温荧光法） |
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小鼠杂交瘤细胞株； VP13-3C11 |
草鱼出血病 I型病毒（GCRV I）RNA核酸检测试剂盒（恒温荧光法） |
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小鼠杂交瘤细胞株； HBsAg-5H2 |
刺激隐核虫核酸检测试剂盒（恒温荧光法） |
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小鼠杂交瘤细胞株； 5E4G5 |
鲤疱疹病毒 Ⅱ型（CyHV-2）核酸检测试剂盒（恒温荧光法） |
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鼠激缺陷细胞株 |
空肠弯曲菌 (CJ)核酸检测试剂盒(荧光-PCR法) |
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小鼠杂交瘤细胞株； 3D-2A10-IgA |
石斑鱼虹彩病毒（ GIV）核酸检测试剂盒（恒温荧光法） |
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小鼠杂交瘤细胞株； 3D-2A10-IgG |
细胞肿大病毒属虹彩病毒（ ISKNV/RSIV）核酸检测试剂盒（恒温荧光法） |
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小鼠杂交瘤细胞株； 3D-3A12-IgA |
赤点石斑鱼神经坏死病毒（ RGNNV）RNA核酸检测试剂盒（恒温荧光法） |
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小鼠杂交瘤细胞株； N2D1 |
传染性造血器官坏死病毒（ IHNV）RNA核酸检测试剂盒（恒温荧光法） |
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小鼠杂交瘤细胞株； 5C8H5 |
原代小鼠晶状体上皮细胞 对虾肝胰腺坏死性细菌（ NHPB）核酸检测试剂盒 |
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小鼠杂交瘤细胞株； 4E11 |
对虾白斑综合症病毒（ WSSV）核酸检测试剂盒（恒温荧光法） |
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病毒性出血性败血症病毒（ VHSV）RNA检测试剂盒（PCR-荧光探针法） |
急性肝胰腺坏死病（ AHPND/EMS）病原核酸检测试剂盒（恒温荧光法） |
1、您收到细胞后，请按照以下方法进行操作：
取出T-25cm2培养瓶，75%酒精擦拭培养瓶，拆下封口膜，放入37℃，5%CO2细胞培养箱中静置4-6小时或过夜，以稳定细胞状态，然后换用新鲜培养液继续培养或进行传代。
2、细胞传代：
1）细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时，弃25cm2培养瓶中的培养液，用PBS清洗细胞一次；
2）添加0.125%消化液约2ml至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入培养液终止消化，再轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至15ml离心管中，1500rpm/min，离心5min；
3）弃上清，沉淀细胞用12ml培养基重悬，然后按1:2比例进行分瓶传代，放入37℃，5%CO2细胞培养箱中培养；
4）待细胞贴壁后，观察培养结果，之后进行换液培养或传代。
3、细胞冻存：
1）细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时，弃25cm2培养瓶中的培养液，用PBS清洗细胞一次；
2）添加0.125%消化液约2ml至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后轻轻吹打细胞使之脱落，再加入培养液终止消化，然后将悬液转移至15ml离心管中，1500rpm/min，离心5min；
3）用适当量的冻存液（基础培养基：FBS：DMSO=7:2:1）重悬细胞，并放置于冻存管中；
4）先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h，然后将其移入-80℃过夜，24h后转入液氮中进行长期保存。
4、细胞复苏：
1）从液氮中取出细胞冻存管（注意：佩戴防爆管面具）， 快速将其置入37℃水浴中解冻，直至冻存管中无结晶，然后用75%的酒精擦拭冻存管外壁；
2）将冻存管中的细胞移至15ml无菌离心管中，滴加入培养液5ml混匀细胞，然后将细胞悬液转移至适当面积大小的培养皿中；
3）放置于37℃，5%CO2细胞培养箱中培养；
4）第二天，换用新鲜培养基继续培养。
